各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局（药品监督管理局），新疆生产建设兵团食品药品监督管理局： 根据《化妆品卫生规范》（2007年版）规定，6-（哌嗪基）-2，4-嘧啶二胺-3-氧化物（米诺地尔）为禁用组分。为做好化妆品中米诺地尔的检测工作，国家局组织有关专家对《化妆品中米诺地尔的检测方法（暂行）》进行了论证，并经国家局化妆品标准专家委员会审评通过，现予印发，请遵照执行。
国家食品药品监督管理局
二○一○年八月二十三日
附件：
化妆品中米诺地尔检测方法（暂行）
1 范围
本方法规定了测定化妆品中米诺地尔的高效液相色谱法。
本方法适用于醇-水、水溶液型发用化妆品中米诺地尔含量的测定。
当样品取样量为1g时，本方法米诺地尔的最低检出限为10μg/g。
2 原理
米诺地尔在280nm处有紫外吸收，可用反相高效液相色谱（hplc）分离，并根据保留时间定性，峰面积定量。
3 试剂与材料
3.1 甲醇，色谱纯。
3.2 冰醋酸，分析纯。
3.3 磺基丁二酸钠二辛酯，分析纯。
3.4 高氯酸，分析纯。
3.5 磺基丁二酸钠二辛酯溶液[ρ=3.0g/l]：称取磺基丁二酸钠二辛酯3.0g，加甲醇-水-冰醋酸（730∶270∶10）混合溶液约950ml溶解，用高氯酸调节至ph3.0，用甲醇-水-冰醋酸（730∶270∶10）混合溶液稀释至1l，摇匀。
3.6 米诺地尔标准储备溶液[ρ=0.25g/l]：准确称取米诺地尔对照品0.025g（精确至0.0001g），置于100ml量瓶中，加磺基丁二酸钠二辛酯溶液（3.5）适量溶解并定容，摇匀。
4 仪器
4.1 高效液相色谱仪，紫外检测器，配色谱工作站。
4.2 超声波清洗器。
4.3 高速离心机。
5 分析步骤
5.1 样品预处理
准确称取样品约1.0g（精确至0.001g），置于50ml量瓶中，加磺基丁二酸钠二辛酯溶液（3.5）约40ml，常温超声提取15min，用磺基丁二酸钠二辛酯溶液（3.5）定容，摇匀。必要时可离心，取上清液经0.45μm 滤膜过滤，续滤液作为待测溶液备用。
5.2 测定
5.2.1 色谱参考条件
5.2.1.1 色谱柱：c18 柱，250mm×4.6mm，5μm；
5.2.1.2 流动相：磺基丁二酸钠二辛酯溶液（3.5）；
5.2.1.3 流速：1.0ml/min；
5.2.1.4 检测波长：280nm；
5.2.1.5 柱温：室温。
5.2.2 校准曲线的制备
分别移取米诺地尔标准储备溶液（3.6）0.20ml、1.00ml、5.00 ml、10.00 ml、20.00ml置于50ml量瓶中，用磺基丁二酸钠二辛酯溶液（3.5）定容，摇匀。配成含米诺地尔分别为1、5、25、50、100μg/ml 的标准溶液。在设定的色谱条件下，分别精密量取10μl 注入高效液相色谱仪，记录色谱图，并绘制峰面积-米诺地尔浓度（μg/ml）校准曲线，线性相关系数不小于0.999。
5.2.3 样品测定
在设定的色谱条件下，精密量取10μl 待测溶液注入高效液相色谱仪分析。若样品中米诺地尔含量超过100μg/ml，应用磺基丁二酸钠二辛酯溶液（3.5）适当稀释后测定，记录色谱图，根据峰面积，以校准曲线计算待测溶液中米诺地尔的质量浓度。按以上步骤取两份样品进行平行试验，并计算相对平均偏差（≤10%）。
6 计算p×v ω（米诺地尔）=------------ ...式中：ω（米诺地尔）-样品中米诺地尔的质量分数，μg/g； ρ-从校准曲线上查得的待测溶液中米诺地尔的质量浓度，μg/ml； v-样品定容体积，ml； m-样品取样量，g。 7 色谱图 图1 米诺地尔标准溶液（25μg/ml）色谱图（略） 8 阳性结果的确认 测定过程中，如果有阳性结果，应采用液相色谱-质谱法进一步确证（参见附录）。 附录： 液相色谱-质谱法 1 范围 本附录适用于上述液相色谱法检出化妆品中米诺地尔的确证。 2 仪器设备 液相色谱-串联质谱仪。 3 液相色谱参考条件 色谱柱：c18柱 流动相：甲醇-水（70∶30）（含0.1%乙酸、0.02mol/l乙酸铵）。 4 溶液制备 采用流动相稀释制备标准溶液和样品溶液，根据仪器灵敏度选择适当的测定浓度。 5 质谱确证依据 表1 监测离子
|
质谱类型 |
母离子[m＋h]＋/（m/z） |
碎片离子（子离子）/（m/z） |
|
离子阱 |
210 |
193、164、137、125 |
|
三重四级杆 |
210 |
193、164、110、84 |
|
相对离子丰度 |
≥50% |
>20%～50% |
>10%～20% |
≤10% |
|
允许的相对偏差 |
±20% |
±25% |
±30% |
±50% |
