农业部公告
（第1779号）
根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，经审查，批准北京市农林科学院等11家单位申报的鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗等2种兽药产品为新兽药，现核发《新兽药注册证书》，并发布产品制造及检验试行规程、质量标准、说明书和标签，自发布之日起执行。
特此公告。
二〇一二年六月四日
附件1：
新兽药注册目录
新兽药名称 | 研制单位 | 类别 | 新兽药注册证书号 | 备注 |
鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗 （la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株） | 北京市农林科学院、北京信得威特科技有限公司、山东华宏生物工程有限公司、四川省华派生物制药有限公司、鹤壁神康生物制品有限公司、北京华都诗华生物制品有限公司、烟台绿叶动物保健品有限公司 | 三类 | （2012）新兽药证字18号 | 注册 |
头孢噻呋注射液 | 华南农业大学、洛阳惠中兽药有限公司、瑞普（天津）生物药业有限公司、广西天荣生物科技有限公司 | 四类 | （2012）新兽药证字19号 | 注册 |
附件2：（略）
附件3：
鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗
（la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株）等2种兽药产品质量标准、说明书和标签
（la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株）等2种兽药产品质量标准、说明书和标签
一、鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗（la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株）质量标准、标签和说明书
（一）鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗（la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株）质量标准
鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗
（la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株）
ji xinchengyi chuanranxingzhiqiguanyan jiandanzonghezheng qinliugan （h9 yaxing） silian miehuoyimiao （la sota zhu＋ m41 zhu ＋ hsh23 zhu＋ wd zhu）
newcastle disease，infectious bronchitis，egg drop syndrome and avian influenza（h9 subtype）vaccine，inactivated（strain la sota＋strain m41＋strain hsh23＋strain wd）
本品系用鸡新城疫病毒（ndv）la sota株、传染性支气管炎病毒（ibv）m41株及a型禽流感病毒（aiv）a/chicken/hebei/wd/98（h9n2）株（简称wd株）分别接种鸡胚培养，减蛋综合征病毒（edsv）hsh23株接种鸭胚培养，收获感染胚液，经浓缩，用甲醛溶液灭活后，按一定比例混合，加入油佐剂乳化制成。用于预防鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征和h9亚型禽流感。
【性状】 外观 乳白色均匀乳剂。
剂型 油包水型。取一清洁吸管，吸取少量疫苗滴于冷水中，除第1滴外，均应不扩散。
稳定性 吸取疫苗10ml加入离心管中，以3500r／min离心15分钟，管底析出水相应不超过0.5ml。
黏度 按现行《中国兽药典》附录进行测定，应符合规定。
【装量检查】 按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合规定。
【无菌检验】 按现行《中国兽药典》附录进行检验，应无菌生长。
【安全检验】 用3～5周龄spf鸡10只，每只颈背部皮下或胸部肌肉注射疫苗2羽份（1.0ml），观察14日，应不出现由疫苗引起的局部和全身不良反应。
【效力检验】 （1）鸡新城疫部分 采用血清学方法进行检验，结果不符合规定时，可采用免疫攻毒法进行。
血清学方法 用3～5周龄spf鸡15只，其中10只各皮下或肌肉注射疫苗20ml（1/25羽份），另5只作对照。接种后21～28日，每只鸡分别采血，分离血清，按现行《中国兽药典》附录进行hi抗体效价测定。免疫组鸡hi抗体效价的几何平均值应不低于1：16，未免疫对照组鸡hi抗体效价均应不高于1：4。
免疫攻毒法 用3～5周龄spf鸡15只，其中10只各皮下或肌肉注射疫苗20ml（1/25羽份），另5只作对照。接种后21～28日，每只鸡各肌肉注射鸡新城疫病毒北京株（cvcc av1611株）105eld50，观察14日，对照组鸡应全部死亡，免疫组鸡应至少保护7只。
（2）鸡传染性支气管炎部分 用3～5周龄spf鸡10只，点眼接种鸡传染性支气管炎活疫苗（h120）1羽份，接种后21日，分别采血，各皮下或肌肉注射灭活疫苗1羽份（0.5m1），21～28日后，再分别采血。将两次血清分别进行hi抗体效价测定（附注1和附注2）。二免血清的hi抗体效价几何平均值应不低于首免血清的4倍。
（3）减蛋综合征部分 用3～5周龄spf鸡10只，每只皮下或肌肉注射疫苗1羽份（0.5ml），21日后，连同对照鸡5只，分别采血，分离血清，测定hi抗体效价，免疫鸡hi抗体效价几何平均滴度应不低于1：128，对照组鸡hi抗体效价均应不高于1：4。
（4）禽流感部分 以下方法任择其一。
血清学方法 用3～5周龄spf鸡15只，其中10只各颈部皮下或肌肉注射疫苗0.3m1，另5只作对照。接种后21～28日，每只鸡分别采血，分离血清，用禽流感病毒h9亚型抗原测定hi抗体（见附注3和附注4）。免疫组鸡hi抗体效价的几何平均值应不低于1：90，未免疫对照组鸡hi抗体效价均应不高于1：4。
免疫攻毒法 用3～5周龄spf鸡15只，其中10只各颈部皮下或肌肉注射疫苗0.3m1，另5只作对照。接种后21～28日，用1∶10稀释的h9亚型aiv wd株毒种进行翅静脉注射，每只鸡0.5m1。攻毒后第5日，分别采集每只鸡的泄殖腔及气管拭子，将同一只鸡的泄殖腔及气管拭子混合后作为1个样品，每个样品经尿囊腔接种9～11日龄spf鸡胚5枚，每胚0.2ml，孵育观察5日，逐胚测定鸡胚液的ha效价。每个样品接种的5枚鸡胚中只要有1枚鸡胚的鸡胚液ha效价不低于1∶16（微量法），即可判为病毒分离阳性。对病毒分离阴性的样品，应盲传1次后再进行判定。免疫组鸡应至少有9只病毒分离阴性，对照组鸡应至少有4只病毒分离阳性。
【甲醛、汞类防腐剂残留量测定】 按现行《中国兽药典》附录进行测定，应符合规定。
【规格】 （1）100ml/瓶 （2）250ml/瓶 （3）500ml/瓶
【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为18个月。
附注
1 鸡传染性支气管炎血凝抑制试验（hi）抗原质量标准
本品系用鸡传染性支气管炎病毒（ibv）m41株接种易感鸡胚培养，收获感染胚液，经超速离心浓缩后，经a型魏氏梭菌滤液处理制成。用于检测鸡传染性支气管炎病毒抗体。
【性状】 白色混浊液体，底部有少量沉淀。
【装量检查】 按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合规定。
【特异性检验】 将ib、nd、ai（h9亚型）、eds、ibd阳性血清及spf鸡血清按附注2.3.1项处理后，与本抗原进行血凝抑制试验。ib阳性血清hi抗体效价应不低于1：128，nd、ai（h9亚型）、eds、ibd阳性血清及spf鸡血清hi抗体效价均应不高于1：8。
【效价测定】 按附注2.2.1项测定ha效价，应不低于1：128。
【作用与用途】 用于检测鸡传染性支气管炎病毒抗体的血凝抑制试验。
【注意事项】 使用时应将抗原充分摇匀。
【规格】 1ml/瓶
【贮藏与有效期】 -20℃以下保存，有效期为18个月。
2 鸡传染性支气管炎hi试验操作术式
2.1 试验材料
2.1.1 ib hi抗原 系用ibv m41株病毒液经100倍浓缩后加入a型魏氏梭菌滤液处理制成。
2.1.2 试剂
2.1.2.1 ha缓冲液 将5.96g hepes、8.19g氯化钠、0.15g氯化钙依次溶解纯化水中至1000ml，用0.1mol/l氢氧化钠溶液或盐酸溶液调至ph值6.5，用0.2mm微孔滤器滤过，分装，置2～8℃保存备用。
2.1.2.2 生理盐水 取9g氯化钠溶解纯化水中至1000ml。
2.1.2.3 红细胞悬液 采集公鸡血液（加入阿氏液抗凝），加入生理盐水，离心，洗涤5次，最后用ha缓冲液将血球泥稀释至1%（v/v）。
2.1.2.4 25%高岭土悬液 取高岭土25g，加纯化水至100ml，再加入0.1mol/l盐酸溶液 250ml，摇匀，静置60分钟，弃上清，用注射用水反复洗涤至中性，置37℃，直至水份完全蒸发，用pbs（0.01mol/l，ph值7.2）配成25%悬液，置2～8℃保存备用。
2.2 ib hi工作抗原的制备
2.2.1 ib hi抗原效价测定
2.2.1.1 在96孔微量板上，从第1孔至第12孔，用加液器每孔加入ha缓冲液25ml。
2.2.1.2 取25mlhi抗原，从第1孔起，依次作2倍系列稀释至第12孔，混合，弃去25ml。
2.2.1.3 每孔加入25ml ha缓冲液。
2.2.1.4 每孔加入25ml 1%鸡红细胞悬液，每块板上设稀释液和红细胞悬液对照孔。
2.2.1.5 将微量板置振荡器上振荡30秒，置2～8℃作用45分钟，判定结果。判定时，将微量板倾斜45度。对照孔的红细胞完全沉淀到孔底中心，呈泪珠样流淌，ha阳性孔的红细胞则均匀分布于孔底或呈锯齿样凝集。使红细胞完全凝集的最大稀释倍数为该抗原的ha效价。
2.2.2 ib hi工作抗原的配制 如果ib hi抗原凝集价测定结果为1：1024（举例），则4个ha单位为1：256（1024÷4=256），这时可将hi抗原用ha缓冲液稀释256倍，即成4 ha单位的工作抗原液。
2.3 hi试验操作方法
2.3.1 待检血清的处理 取0.1ml血清，加入0.3ml 25%高岭土悬液，混匀，置37℃ 60分钟，以6000r/min离心15分钟，取上清，即为1：4稀释的待检血清。
2.3.2 hi试验操作方法
2.3.2.1 在96孔微量板上，每行从第2孔开始，每孔加入25mlha缓冲液，直至第12孔。
2.3.2.2 分别在第1、2、12孔中加入处理过的待检血清25ml。
2.3.2.3 用加样器从第2孔起作2倍系列稀释，直至第10孔（血清稀释倍数从第1孔的1：4、第2孔的1：8……至第10孔的1：2048），弃去25ml。
2.3.2.4 向第1～11孔中加入25ml 4 ha单位的抗原，在微量振荡器上振荡30秒，室温下作用30分钟。
2.3.2.5 每孔加入25ml红细胞悬液，振荡30秒，放2～8℃下反应30～45分钟，判定结果。
2.3.3 每次测定时应设阴性血清对照和已知hi抗体效价的阳性血清对照。
2.3.4 结果判定 判定时将反应板倾斜45度。只有当阴性对照血清hi效价不高于1：8、阳性对照血清hi效价与已知结果相比误差不高于1个滴度时、抗原对照孔（第11孔）中红细胞完全凝集、血清对照孔（第12孔）中的红细胞完全沉淀时，试验结果方为有效。若红细胞沉淀呈泪珠样流淌，判为hi阳性；若红细胞在孔底均匀分布或呈锯齿状凝集，判为hi阴性。以完全抑制红细胞凝集的最高血清稀释倍数作为待检血清的hi抗体效价。
3 h9亚型禽流感血凝抑制（hi）试验抗原制造及检验标准
3.1 抗原制造
3.1.1 病毒繁殖 取a型禽流感病毒a/chicken/hebei/wd/98（h9n2）株生产用毒种，用spf鸡胚繁殖病毒，收获鸡胚液。
3.1.2 灭活 取含毒鸡胚液，加入10%甲醛溶液，使其终浓度均为0.2%，37℃灭活24小时。
3.1.3 配制 灭活后的鸡胚液，加入灭菌甘油25%，充分混匀，定量分装，2～8℃保存。
3.2 检验
3.2.1 性状 白色或淡黄色液体。
3.2.2 装量检查 按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合规定。
3.2.3 无菌检验 按现行《中国兽药典》附录进行检验，应无菌生长。
3.2.4 效价测定 按瓶签标明的量用灭菌生理盐水进行稀释，用微量法测定ha效价，应不低于1：128。
3.2.5 特异性检验 分别与nd、eds76、h5亚型禽流感、h7亚型禽流感阳性血清，spf鸡血清和h9亚型禽流感阳性血清作hi试验，抗原对h9亚型禽流感阳性血清应为阳性，对nd等其他阳性血清及spf鸡血清应为阴性。
3.2.6 规格 1ml/瓶
3.2.7 贮藏与有效期 2～8℃保存，有效期为6个月。
4 h9亚型禽流感hi试验操作术式
4.1 取微量反应板，分别向1～11孔中加入25ml生理盐水，第12孔中加入50ml生理盐水。
4.2 吸取25ml血清，加至第1孔内，充分混匀后，吸取25ml至第2孔，依次2倍稀释至第10孔，从第10孔吸取25ml，弃去。
4.3 分别向1～11孔中加入含4ha单位的抗原25ml，室温下静置30～40分钟。
4.4 每孔中加入25ml 1%（v/v）鸡红细胞悬液，轻轻混匀，室温下静置30～40分钟。对照红细胞将呈显著纽扣状。
4.5 结果判定 将反应板倾斜后判定结果。当阴性对照血清hi效价不高于1：4、阳性对照血清hi效价与已知结果相比，误差不超过1个滴度时，试验方可成立。以完全抑制4 ha单位抗原的血清最高稀释度作为hi效价。
（二）鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗（la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株）标签
兽用
鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗
（la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株）
100（250、500）ml/瓶 批准文号：
生产批号：
有效期至：
【作用与用途】用于预防鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征和h9亚型禽流感。
免疫接种后14～21日产生免疫力。免疫期为6个月。
【用法与用量】 颈部皮下或肌肉注射。开产前（16～20周龄）产蛋鸡，每只0.5ml。
【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为18个月。
【批准文号】
【生产企业】
仅在兽医指导下使用
（三）鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗（la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株）说明书
兽用
【兽药名称】
通用名 鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（h9亚型）四联灭活疫苗（la sota株＋m41株＋hsh23株＋wd株）
商品名 无
英文名 newcastle disease，infectious bronchitis，egg drop syndrome and avian influenza（h9 subtype）vaccine，inactivated（strain la sota＋strain m41＋strain hsh23＋strain wd）
汉语拼音 ji xinchengyi chuanranxingzhiqiguanyan jiandanzonghezheng qinliugan （h9 yaxing） silian miehuoyimiao （la sota zhu＋ m41 zhu ＋ hsh23 zhu＋ wd zhu）
【主要成分与含量】 每羽份（0.5ml）疫苗中含灭活的鸡新城疫病毒la sota株≥108.5eid50、鸡传染性支气管炎病毒m41株≥106.5eid50、减蛋综合征病毒hsh23株≥1000 ha单位，禽流感（h9亚型）病毒 wd株≥107.5eid50。
【性状】 乳白色均匀乳剂。
【作用与用途】 用于预防鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征和h9亚型禽流感。
免疫接种后14～21日产生免疫力。免疫期为6个月。
【用法与用量】 颈部皮下或肌肉注射。开产前（16～20周龄）产蛋鸡，每只0.5ml。
【不良反应】 一般无可见不良反应。
【注意事项】 （1）仅对健康鸡群进行免疫接种。
（2）用鸡新城疫及传染性支气管炎活疫苗进行基础免疫后，再接种本疫苗，可提高对鸡新城疫及传染性支气管炎的免疫预防效果。
（3）疫苗使用前应充分摇匀，并使疫苗升到室温。
（4）疫苗开启后应于24小时内用完。
【规格】 （1）100ml/瓶 （2）250ml/瓶 （3）500ml/瓶
【包装】 20瓶/箱
【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为18个月。
【批准文号】
【生产企业】
仅在兽医指导下使用
二、头孢噻呋注射液质量标准、标签和说明书
（一）头孢噻呋注射液质量标准
头孢噻呋注射液
toubaosaifu zhusheye
ceftiofur injection
本品为头孢噻呋、大豆油和硬脂酸铝制成的无菌混悬液，含头孢噻呋（c19h17n5o7s3）应为标示量的90.0%～110.0%。
【性状】 本品为细微颗粒的混悬液，静置后细微颗粒下沉，振摇后成均匀的灰白色至灰褐色的混悬液。
【鉴别】 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
【检查】 有关物质 照含量测定项下的方法，取含量测定项下的下层溶液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置50ml量瓶中，用0.05mol/l醋酸铵溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取供试品溶液与对照溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍（3%）。供试品溶液中任何小于对照溶液主峰面积0.1倍的色谱峰可忽略不计。
粒度 取本品，摇匀后，照粒度和粒度分布测定法（附录98页第一法）测定，含15µm以下的颗粒不得少于90％，不得有50µm以上的颗粒。
沉降体积比 取本品适量，用力振摇1分钟，用具塞量筒量取供试品50ml，密塞，用力振摇30秒，记下混悬物的开始高度h0，静置3小时，记下混悬物的最终高度h，沉降体积比（h/h0）应不低于0.90（附录16页）。
无菌 取本品适量混匀，分别取30ml和青霉素酶溶液适量（每1mg头孢噻呋加青霉素酶不得少于2万单位）加入到含6%吐温-80的硫乙醇酸盐培养基270ml和含6%吐温-80的改良马丁培养基270ml中，摇匀，置37℃恒温水浴中1小时作为供试品溶液，依法检查（附录137页），结果应符合规定。
其它 应符合注射剂项下有关的各项规定（附录6页）。
【含量测定】 照高效液相色谱法（附录36页）测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以醋酸铵溶液（取醋酸铵3.95g，加10%四丁基溴化铵溶液67ml，加水至700ml，用冰醋酸调节ph值至6.5～6.8）-甲醇-四氢呋喃（70：20：11）为流动相，检测波长为254nm。理论板数按头孢噻呋峰计算不低于1500。
测定法 取本品适量（约相当于头孢噻呋250mg），精密称定，置25ml量瓶中，用二甲基甲酰胺-正丁醇（1：1）适量溶解，超声2分钟， 用二甲基甲酰胺-正丁醇（1：1）稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml至干燥的分液漏斗中，精密加入0.05mol/l醋酸铵溶液20ml与正已烷10ml，振摇2分钟，静置15分钟，精密量取下层液5ml，置50ml量瓶中，用0.05mol/l醋酸铵溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取头孢噻呋对照品10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加二甲基甲酰胺-正丁醇（1：1）1ml溶解，用0.05mol/l醋酸铵溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用0.05mol/l醋酸铵溶液稀释至刻度，摇匀，同法测定，按外标法以峰面积计算。另取本品，同时测定其相对密度，将供试品量换算成ml数计算，即得。
【作用与用途】 头孢菌素类抗生素。用于治疗猪呼吸道细菌性感染，如猪副嗜血杆菌病。
【用法与用量】 以头孢噻呋计。肌内注射：一次量，每1kg体重猪5mg，三日1次，连用2次。
【不良反应】 按推荐剂量使用，暂未见不良反应。
【注意事项】 1.肾功能不全的动物慎用。2.使用前充分摇匀。
【休药期】 猪5日
【规格】 按c19h17n5o7s3计 （1）10ml：0.5g （2）20ml：1.0g （3）50ml：2.5g （4）100ml：5.0g （5）10ml：1.0g （6）20ml：2.0g （7）50ml： 5.0g （8）100ml：10.0g
【贮藏】 遮光，干燥保存。
【有效期】 暂定2年
【生产企业】
（二）头孢噻呋注射液标签
兽用
【主要成分】 头孢噻呋
【适应症】 用于治疗猪呼吸道细菌性感染，如猪副嗜血杆菌病。
【用法与用量】 以头孢噻呋计。肌内注射：一次量，每1kg体重猪5mg，三日1次，连用2次。
【休药期】 猪5日
【规格】 按c19h17n5o7s3计（1）10ml：0.5g （2）20ml：1.0g （3）50ml：2.5g （4）100ml：5.0g （5）10ml：1.0g （6）20ml：2.0g （7）50ml： 5.0g （8）100ml：10.0g
【包装】
【贮藏】 遮光，干燥保存。
【生产日期】
【生产批号】
【有效期至】
【批准文号】
【生产企业】
（三）头孢噻呋注射液说明书
兽用
【兽药名称】
通用名称：头孢噻呋注射液
汉语拼音：toubaosaifu zhusheye
英文名称：ceftiofur injection
【主要成分】 头孢噻呋
【性状】 本品为细微颗粒的混悬液，静置后细微颗粒下沉，振摇后成均匀的灰白色至灰褐色的混悬液。
【药理作用】 头孢类菌素类畜禽专用抗生素，广谱杀菌作用。对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌（包括产β-内酰胺酶菌）均有效。敏感菌主要有多杀性巴氏杆菌、溶血性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌、葡萄球菌等，某些绿脓杆菌、肠球菌耐药。
【适应症】 用于治疗猪呼吸道细菌性感染，如猪副嗜血杆菌病。
【用法与用量】 以头孢噻呋计。肌内注射：一次量，每1kg体重猪5mg，三日1次，连用2次。
【不良反应】 按推荐剂量使用，暂未见不良反应。
【注意事项】 1.肾功能不全的动物慎用。2.使用前充分摇匀。
【休药期】 猪5日
【规格】 按c19h17n5o7s3计（1）10ml：0.5g （2）20ml：1.0g （3）50ml：2.5g （4）100ml：5.0g （5）10ml：1.0g （6）20ml：2.0g （7）50ml： 5.0g （8）100ml：10.0g
【包装】
【贮藏】 遮光，干燥保存。
【有效期】 暂定2年
【批准文号】
【生产企业】
